某集团化企业的动保产品品质评估方案｜Part2

常橙

自2021年6月之后，养猪产业进入到持续的低迷期，虽然2022年与2024年都有阶段性盈利，但各企业均在努力的降低各项成本，包括兽医、疫苗等动保产品的成本。

动保产品持续走低，超过50%的动保企业在今年上半年都无法盈利，在此背景下，动保产品的品质是否能够保障呢？养殖企业该如何持续的对动保产品进行评估呢？

对于绝大部分的养猪企业而言，并没有能力对所有的动保产品进行品质的评估，从而可能导致在采购极限降本的情况下，低品质的动保产品造成高大的经济损失。故建立评估体系至关重要。

01

血清和疫苗评估

抗血清：通过用抗原多次免疫动物，提取血清制成，目前在养猪生产中应用较少。

疫苗：作为预防用兽用生物制品，已上市猪用疫苗产品包括灭活疫苗、活疫苗、亚单位疫苗、合成肽疫苗、基因缺失疫苗、重组活载体疫苗等。

对于疫苗的实验室评估，其中亚单位疫苗主要从蛋白纯度与抗原含量方面进行评估，活疫苗主要从病毒效价与外源性污染等方面进行评估。

但对于多数产品而言，仅靠体外实验室评估是不够的，需要进行动物试验，以评估免疫后的保护效果及对生产成绩的改善，尤其是：圆环疫苗、支原体疫苗及蓝耳疫苗等评估。

按照《兽药典》有关兽用生物制品的一般规定，体外主要需要进行以下几项检验。

1）性状检验：凡含有异物、摇不散的凝块、絮状物、霉团、变质和冻干制品形成干缩、瓶破裂者，均判定为不合格品。

2）真空度测定：用电火花真空检测仪检测冻干活疫苗瓶的真空度，灭活苗一般不需要。

3）支原体检验：每批成品均按规定进行支原体检验，且应符合规定。

4）活菌计数：每批制品取样三个，通过3M菌落总数测试片进行检查鉴定。

5）效力检验：灭活苗主要通过动物免疫保护试验进行检测，其次可以通过SDS-PAGE电泳检测抗原含量。活疫苗可以通过TCID50检测病毒毒力效价。

6）额外检验：活疫苗除了检验支原体，还需要检验圆环病毒（PCV2）等除疫苗毒株以外的重要病毒，以评估疫苗的纯净度。

➤ 真空度检测

准备材料：待检疫苗，高频电火花真空度检测仪，青霉素瓶。

A. 使用前，先将高频发射器插头插到高压变压器的插座上，然后接通电源、在高频发射器弹簧电极上应有强烈火花跃出，并发出咝咝声即可使用；

B. 用已开封的青霉素瓶作为对照，如果光束为弥散状态，且瓶内无辉光，证明仪器正常；
C. 弹簧电极距离玻璃仪器或疫苗瓶10mm进行检测，若其为真空状态则光束会发生聚集，且瓶内的游离残余气体就发生电离现象，出现白色、粉丝或蓝色辉光现象，即可判断制品为合格。
➤ 支原体检验

准备材料：待检疫苗、PCR仪器、移液枪和枪头、电泳仪、照胶仪

A. 灭活苗直接开启/活疫苗用灭菌水混匀后，取部分液体作为模版；

B. PCR体系为25μl，按要求配制反应体系，根据检测样本数+1个阴性对照（不加模板）+阳性对照，算出PCR样本的个数，增加3-4管的量，混匀后分装到8连管，最后加入疫苗液体；
C. PCR产物进行电泳，结果拍照保存后分析。
➤ 活菌计数

准备材料：待检疫苗，无菌生理盐水，3M Petrifilm AC 测试片，3M Petrifilm压板，EP管（稀释用）

A. 样品制备，用适宜的无菌稀释剂（如生理盐水）将样品稀释混混匀；

B. 将3M Petrifilm AC 测试片放置在平坦且水平的表面上，掀起上层薄膜，让滴管垂直于接种表面，将 1 mL样品混悬液滴于底层薄膜的中央位置；

C. 将上层薄膜重新覆于样品上，之后将3M Petrifilm压板（凹入端朝下）放置于3M Petrifilm AC测试片的中央位置。轻轻地压按3M Petrifilm压板，直至边缘出现压痕；

D. 取走3M Petrifilm 压板，至少静置3M Petrifilm AC测试片1分钟时间以使凝胶凝固；

E. 将测试片的透明面朝上水平放置，于37℃培养箱培养3M Petrifilm AC测试片，最多可堆叠至 20 片测试片；
F. 在18h、24h、36h后，分别观察测试片有无变化，如有变化记录红点数目，统计菌落数。
➤ 效力检验（针对弱毒疫苗）

准备材料：复苏疫苗毒株适宜生长的细胞，生理盐水，培养基，血清，细胞瓶，无菌96孔板，高压过的EP管

A. 提前将高压过的EP管在管架上摆好，每管加900ul含2%血清的培养基，之后将冻干保存的疫苗用无菌生理盐水稀释成一头份100ul，取100ul病毒液作连续10倍的稀释，从10-1~10-6；

B. 弃去96孔培养板内的废液，每孔加上100ul新鲜培养基，再将稀释好的病毒接种到培养板中，每一稀释度接种一横排共6 孔，每孔接种100µl，依次接种到10-6；

C. 留2排作为对照组，即正常细胞不做处理（只加200µl培养基）；

D. 逐日观察并记录结果，一般需要观察5-7天；

E. 结果的计算，按Reed-Muench法计算。

**Reed-Muench两氏法

➤ 效力检验（针对灭活疫苗）

准备材料：BCA试剂盒，电泳槽，电泳架，制胶板，照胶仪

A. 以BCA法测定各疫苗样品蛋白含量，调整疫苗上样体积达到上样蛋白质量（如6µg）一致；

B. 配制适宜（6%~12%）凝胶浓度的蛋白胶，加上蛋白质量一致的疫苗样品，最边上加上Marker，之后打开电泳仪开始电泳；

C. 待电泳结束后，将凝胶从电泳仪拿出放置照胶仪中，拍照记录，分析对应的条带大小及灰度值。

➤ 额外检验

准备材料：待检疫苗，PCR仪器，移液枪和枪头，电泳仪，照胶仪

A. 灭活苗直接开启/活疫苗用灭菌水混匀后，取部分液体作为模版；

B. PCR体系为25μl，按要求配制反应体系，根据检测样本数+1个阴性对照（不加模板）+阳性对照，算出PCR样本的个数，增加3-4管的量，混匀后分装到8连管，最后加入疫苗液体；

C. 依次检测BVDV、PCV2等除疫苗毒株以外的病毒；
D. PCR产物进行电泳，结果拍照保存后分析。
➤ 评分机制

按照以上的评估方法，对兽药进行排名及打分。

02

消毒剂品质评估

依据《消毒技术规范》中有关消毒剂鉴定测试项目的规定，主要进行以下几项检测。

1）有效成分含量的测定：有效成分系指具有杀菌作用的成分。所有化学消毒剂均应进行本项检测。复方化学消毒剂测其杀菌主要成分的含量。植物消毒剂和用其提取物配制的消毒剂可不测定有效成分。

2）pH值的测定：所有消毒剂需测定消毒剂原液的pH 值，固体消毒剂应测定应用浓度的pH值。对于需调节pH后使用的消毒剂则应在pH调节剂加入前后分别测定pH值。

3）稳定性试验：所有消毒剂均应进行稳定性试验，可用经验法37℃，90d和/或54℃,14d；也可选用自然留样法。能测定有效成分的消毒剂用化学法进行试验，不能测定有效成分的消毒剂用微生物法进行试验。

4）金属腐蚀性试验：用于金属物品消毒的消毒剂应进行本项检测，试验浓度应选择最高使用浓度。
5）微生物杀灭试验：所有消毒剂均应进行本项检测。试验前, 必须先按不同种类的试验微生物分别进行相应的化学中和剂或其它残留消毒剂去除法的鉴定试验，选出适宜的中和剂用于各类微生物的杀灭试验。
➤ 评分机制

按照以上的评估方法，对消毒剂进行排名及打分。

以上方法，仅供参考。

对于规模化养猪企业而言，可以根据其投入品的总消耗量及其对生产影响的大小等，排查优先等级，分别进行品质的评估测定等。选出性价比更高的产品，而对于绝大部分的养猪企业而言，更多的需要依靠产品的口碑、市占率、临床应用结果等维度进行简单评估。

— END —

审校｜韩宏宇

排版｜珞珞

微信扫一扫，阅读更方便^_^

某集团化企业的动保产品品质评估方案｜Part2

相关帖子

11月12日全国鸡蛋最新价格

X染色体基因组对奶牛生产性状影响的研究进展

蛋价早报（11月13日）鸡蛋价格

1株H3N2亚型猪流感病毒的分离鉴定、基因序列分析及其致病性评价

牛肉中的“SB”是什么意思？

常橙 LV8

某集团化企业的动保产品品质评估方案｜Part2

相关帖子

11月12日 全国鸡蛋最新价格

X染色体基因组对奶牛生产性状影响的研究进展

蛋价早报（11月13日）鸡蛋价格

1株H3N2亚型猪流感病毒的分离鉴定、基因序列分析及其致病性评价

牛肉中的“SB”是什么意思？

常橙 LV8

11月12日全国鸡蛋最新价格