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病毒检测CT值与其致病性之间是否存在必然关系?

保健 保健 878人阅读 | 11-01   点评   回复  + 发帖    分享

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各位养猪产业链的同行们,大家好!

自非洲猪瘟之后,qPCR方法快速在养猪产业内得到应用,其检测范围,也逐渐从非洲猪瘟病毒,扩大至蓝耳病毒、PEDV病毒及伪狂犬病毒等绝大部分的病毒或细菌性疾病的检测。

qPCR属于定量PCR检测技术,其检测值以CT值(循环数)表示,即:CT值越低,通常认为样品中病毒载量越高,而CT值越高,则认为样品中的病毒载量越低。通常qPCR进行45个循环,一般血液与组织样品的CT值一般在15-40之间,根据样品中病毒载量与检测体系的差异性而有所调整。



01

临床中常见的问题

在临床中,经常会被问及一个问题:是否临床样品的CT值越高,毒力就越弱呢?这个问题从非洲猪瘟、蓝耳病毒及伪狂犬等病毒均有人问及到(如:下图)。

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为何兽医或生产人员会将CT值与病毒毒力强弱联系起来呢?

我想大致是因为在非洲猪瘟的检测过程中,大家形成的一种直观感觉。比如:2019年检测到的非洲猪瘟病毒通常是II型的野毒,毒力强,血液样品的CT值通常在20-25之间。而到2020年之后,逐渐出现各种类型的基因单缺失和双缺失病毒感染案例,刚出现临床症状时,唾液或血液样品中的CT值通常在30以上,甚至在35以上。所以给行业从业者的一种印象:似乎毒力越弱,CT值就越高。

看似有一定的道理,但这样理解很容易在临床判断时产生误导。

因为血液样品的CT值与病毒载量有关,而病毒载量除了与病毒自身在体内的复制能力有关外,还与感染猪日龄、感染发生阶段有关。

病毒血症有一定的持续期,通常刚出现病毒血症时,病毒载量低,CT值越高,随后病毒载量逐渐增高,CT值逐渐降低,随后病毒载量又逐渐降低,直到消失。



大日龄后备选留与PRRSV野毒检测

比如:在临床后备母猪选留时,需要对后备母猪的血液或唾液样品进行蓝耳病毒的检测,一旦检测病毒阳性,对于曾经免疫过蓝耳弱毒疫苗的猪群,则需要进行测序,以鉴别是蓝耳疫苗毒还是野毒感染,若是野毒感染,则不能选留。

但测序通常对CT值在30以内的样品的成功率高,而CT值在30以上的样品,很容易测序失败。此时,很多兽医就想当然认为,CT值高于30,应该是蓝耳疫苗毒,故即使测序失败,依然坚持将后备母猪引种入群。但入群后不久,就会导致基础群蓝耳病大爆发。

这样的临床案例很多。对于蓝耳病,并非是血液样品的CT值越高,PRRSV的毒力就越低,更不能认为CT值>30的,都不是野毒感染。

02

如何确定病毒毒力?可以依照毒力基因吗?

这个问题也很有意思。

在临床上,通常会有人问:蓝耳的欧洲毒株是否都是弱毒株?我的观点是:绝大部分的欧洲毒株的临床危害较小,所以欧洲的蓝耳病感染的经济损失较美国也小些。但欧洲毒株也有毒力强的毒株,比如2023年西班牙发生了大规模的蓝耳病,导致了全国上市育肥猪数量下降了10%,母猪也可以发生死亡。

还有一个问题:是否可以在测序后,根据经典毒株、高致病性毒株、NADC30、NADC34等这些基因型分类,预测蓝耳病毒在猪群造成的经济损失呢?

我的答案是不能。高致病性毒株是2008年的分类方法,但并不代表今天感染HP-PRRSV的经济损失都很大。

另外,即使在同一个母猪群,不同生产条线,同时感染了同一个蓝耳病毒株(比如:NADC30),因为母猪群所处的妊娠阶段、猪群的免疫状态及猪群环境控制管理等不同,也会导致不同的经济损失。

同样都是NADC30毒株,但全基因序列的同源性有时差别很大,且致病性差别也很大,还不一定存在交叉保护力。所以,不能简单根据病毒株的基因分类,就判断某个病毒株的毒力是否强,是否会导致严重的经济损失。

预测病毒毒力的方法,就是攻毒试验,根据感染猪群的临床损失来判断。有些毒力基因的缺失,的确会极大降低某个病毒的临床危害,但具体毒力多强,其经济损失多大,依然要依靠动物试验来验证。



03

总    结

我认为:病毒检测CT值与其致病性之间没有必然关系。

对于某些弱毒株(尤其是商品化疫苗,比如:PRRSV),其血液中病毒血症的确要低很多,病毒血症持续期也会更短些。对于毒力强的毒株,通常在体内病毒复制能力更强,会出现更高的病毒载量。但当毒力强的病毒,位于感染早期与晚期时,CT值也可能很高,血液中病毒载量低。但不能根据临床血液样品的CT值,就简单给予结论。甚至盲目的判断,CT值高的,都是疫苗毒株感染。否则,在临床诊疗上就非常危险。



  — END —

审校|韩宏宇

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